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翻译文：
华法林治疗患者的血栓弹力图和凝血酶生成测定的相关性
1摘要
静脉血栓栓塞(VTE)每年影响大约1/人。虽然患者越来越多地使用直接口服抗凝药物治疗，但许多患者继续使用抗凝维生素K拮抗剂(VKA)。在VKA治疗期间最重要的不良事件是出血和复发VTE，很难预测。全球公认的止血试验，如凝血酶生成试验，粘弹性全血试验血栓弹力图(TEG)和血栓弹力图(ROTEM)有助于全面评估止血并可能预测潜在的副作用。
在本研究中，我们比较了84例经华法林治疗的原发或复发性VTE的患者和87名健康对照者凝血酶产生(校准自动血栓图和创新ETP检测)以及的TEG和ROTEM。VKA处理导致滞后时间延长和总凝血酶生成降低，这与INR(Pearsonr=0.89和r=?0.85）密切相关。组织因子激活的ROTEM(EXTEM)凝血时间延长(与CAT滞后时间相比，r=0.87)准确地反映了VKA治疗患者凝血酶生成的减少)。凝血酶生成对凝血块强度或凝块形成动力学影响较小。内源性途径激活的TEG或ROTEM(INTEM)对凝血酶生成的减少不敏感。
总之，VTE后VKA抗凝治疗VKA的组织显示血浆凝血酶生成减少，这可以通过组织因子激活的ROTEM准确地反映出来。ROTEM提供了凝血酶生成的更多信息，包括血凝块的形成动力学和强度。
介绍
静脉血栓栓塞症（VTE）的口服药理管理，是每人年1.0-1.8的常见疾病[1-3]，由维生素K拮抗剂（VKA）或直接口服抗凝剂（DOAC）组成。尽管DOAC的使用有所增加，但许多患者仍继续使用VKA治疗。在VKA治疗期间，出血是最常见的副作用，估计有3％的患者发生严重出血，病死率为7％[4-7]。复发性VTE，另一个重要并发症，发生在VKA治疗期间的3–8％的患者中[8,9]。
使用国际标准化比率（INR）在血浆中进行VKA治疗期间抗凝效果的监测，该方法简便易行，可在常规环境和现场护理设备中实施。当形成总凝血酶的10％时，便会出现基于INR的凝块读数，因此不完全代表凝血酶的生成潜能[10,11]。在INR测量期间，影响全血止血的重要因素，即纤维蛋白原水平，纤维蛋白溶解，红细胞，血小板和白细胞的计数或血浆容量没有考虑在内[12,13]。整体止血分析可更广泛地评估抗凝和血液静息能力，可能为预测VKA治疗期间的副作用提供有用的信息。INR的替代方法是通过凝血酶生成测定（TGA）对血浆凝血酶生成进行评估，该方法可提供有关凝血级联反应的起始，扩增和传播的信息。TGA可以很容易地检测出VKA的抗凝和INR延长[14-16]。
并且一些研究表明，TGA可以预测抗凝治疗终止后的VTE复发[17,18]。TEG提供有关凝血动力学，凝块强度，高凝性和纤维蛋白溶解的信息。这些测试得益于即时可用性，无需进一步样品处理即可使用全血以及可快速获得的测试结果[19,20]。ROTEM对VTE的高凝性检测很敏感[21]。此外，在组织因子激活的全血凝试验中，凝血时间的延长可以准确检测VKA的抗凝性[22,23]，使得在VTE中使用这些检测成为可能。鉴于这些不同的选择，目前尚不清楚哪种检测方法在抗凝治疗期间可能提供更相关或更全面的信息。本研究以一组VTE患者为研究对象，与对照组相比，评估了接受VKA治疗的患者血浆和全血总凝血测定的相关性。通过使用手动和半自动TGA，TEG和ROTEM，我们探索了血浆和全血检测是否可以提供其他信息。
2材料和方法本前瞻性观察研究已由斯德哥尔摩地区伦理委员会批准，并根据赫尔辛基的第二份声明进行。所有参与者均给予口头和书面知情同意。先前已经描述了研究人群[23]。总之，在瑞典斯德哥尔医院的门诊凝血科连续招募了华法林治疗的患者（n=），医院血库中将献血者作为健康对照（n=89）。在本研究中，如果患者接受了除原发性或复发性VTE以外的其他适应症（n=15）的治疗，则将其排除在外（图1）。通过回顾电子病历和参与者问卷收集基线特征，当前用药情况和出血史。通过对年3月2日的电子病历进行回顾性评估，对血栓和出血事件进行临床随访（补充数据）.
2.1样品制备和临床化学检测
通过前肘静脉穿刺从每个参与者中抽取EDTA和枸橼酸抗凝血液。健康对照者和患者的实验过程一致。乏血小板血浆通过在g离心15分钟来制备，并在30分钟-70°C下储存以进行凝血酶生成的批分析。医院临床化学系进行了包括全血细胞计数，aPTT和纤维蛋白原在内的基线实验室测试。INR是使用Owrenmethod与来自Stago（AsnieressurSeince，CedexFrance）的Spa试剂在Sysmexi（SiemensMarburg，Germany）分析仪上通过EQUALIS（瑞典Uppsala）校准器测定的。
2.2血栓弹力描记术和血栓弹力描记术
全血凝固的曲线通过TEG（HaemoscopeCorp.;Niles，IL，USA）上使用高岭土作为活化剂的血栓弹力描记术确定，又在ROTEMdelta系统（TEMInnovationsGmbH;慕尼黑，德国）进行旋转血栓弹性测量，采用三种:由鞣花酸（INTEMreagent；TEM创新有限公司），组织因子（EXTEM试剂；TEMInnovationsGmbH）或组织因子和血小板抑制剂细胞松弛素D（FIBTEM试剂；TEMInnovationsGmbH）激活的测定法先前已描述[23,24]。
2.3凝血酶生成分析
即将分析之前，将冷冻的乏血小板血浆浸入37°C的水浴中解冻；所有样品均遵循相同的步骤。然后在两个平行的测定中测量凝血酶的产生。首先，按照制造商的说明，通过CalibratedAutomatedThrombogram方法（CAT?;ThrombinoscopeBV，Maastricht，TheNetherlands）测量凝血酶的产生。每个样品一式三份进行测量。测定中使用的PPP试剂（触发剂）和PPP的最终混合物包含5pM组织因子（TF）和4mM磷脂。所有试剂均从荷兰马斯特里赫特的ThrombinoscopeBV公司获得。从瑞典斯德哥尔摩的Ninolab获得了96孔板。其次，还通过BCS?XP系统（西门子）对凝血酶的生成进行了自动化测试（Innovance?内源性凝血酶潜能[ETP]；SiemensHealthcareDiagnosticsProductsGmbH，德国Marburg）。，根据制造商的说明。该测试通过组织因子和肌动蛋白的组合激活，激活内在和外在的凝血途径（制造商提供的信息）。使用制造商的曲线评估软件对凝血酶生成曲线进行可视化和分析。创新测定的移液方案C的测定内和测定间CV分别为4.6％和4.9％。
2.4统计分析和数据共享
使用R版本3.3.1（年6月;可从
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